精液常规检查
1.检验目的
精液由精子和精浆组成,精子由睾丸细胞产生,在附睾内成熟,通过输精管运输;精浆主要由精囊腺(约50~65%)、前列腺(约30~40%)和尿道球腺等附属腺(睾丸、输精管等,约3~5%)分泌的混合液。精液常规检查的主要目的是评价男性生育能力,为不育症的诊断和疗效观察及辅助诊断男性生殖系统疾病提供依据。
2.检验原理
纪录颜色、液化时间、精液量、酸碱度。显微镜检查包括精子计数、活动力、活动率、精子形态、镜下白细胞。
3.标本采集:
3.1标本采集前病人准备:必须禁欲(包括遗精和手淫)3~7天。这是因为少于48小时采取的精液,因相距时间太短,精液中精子的数量可能偏少,容易造成少精症的假象。如果超过7天,精子活率、活力都有所下降,也可造成弱精子症的假象。精液检查应间隔一周或两周,要进行2~3次检查。因为一个人精子的产生在一年中,可因季节、气候等,诸多因素的影响而有一些变化。
3.2标本种类:精液
3.3标本要求:用清洁干燥小瓶收集,不应采用避孕套内精液。
3.4标本储存:立即送检。
3.5标本运输:室温运输,冬季需保温运输。
3.6标本拒收标准:久置标本,污染标本,避孕套内标本。
4.试剂
精子稀释液,瑞氏染液,改良Neubauer计数板
5.操作步骤:
5.1纪录颜色、液化时间、精液量、酸碱度。
5.2精子活动率:标本液化后混匀取1滴涂于玻片上用高倍镜观察个精子,计数活动精子与不活动精子的比例,计算精子活动的百分率。
精子活动率=活动精子数/(活动精子数+不活动精子数)×%
5.3取上述液化标本1滴涂于玻片上,高倍镜下观察10个,视野观察精子的活动力,第二版《全国临床检验操作规程》将精子活动力分为如下五级:
0级:死精子,无活动力,加温后仍不活动;
I级:精子运动力不良,运动迟缓,原地打转或抖动;
II级:精子活动力较好,运动方向不明确,不呈直线运动,也不活泼;
III级:为中速运动,但波形运动的较多;
IV级:精子活动力良好,为快速直线运动,很快超越1个视野,运动活泼。
5.4精子计数:
5.4.1于试管内加精子稀释液0.38ml,吸液化精液20μl,加入精子稀释液内摇匀。
5.4.2充分摇匀后,滴入血细胞计数池内,静置1-2min,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
5.4.3如精子数少,可计数两个大方格内精子数,总数乘以10万即为每毫升精液内精子数,再换算成×/L报告。
5.4.4如精子数多,可计数5个中方格内精子数,总数乘以万即为每毫升精液内精子数,再换算成×/L报告。
5.5精子形态观察:革兰氏或瑞氏染色后用油镜观察。异常精子可有:头部过大、过小、尖细、外缘不齐、双头等;中部消失、分枝或肿胀;尾部呈双尾,卷曲度短或消失(缺尾)。
5.6细胞:红、白细胞5/高倍视野。
5.7pH:7.2-8.0,平均7.8。
6.计算:
精液精子数(/L)=5个中方格的细胞总数/5×25×10×20×10*6
7.干扰因素:
7.1精液标本应收集全部精液于清洁干燥小瓶内,不能用乳胶避孕套采集,因避孕套内含有滑石粉可影响精子活力。如果精液标本有溢漏,均不能作精液检查。
7.2精液标本留取后,应立即送检。如送检时间过长(超过2小时)或运送标本时,温度过低将导致精子活动力下降。
7.3精子计数前应将液化标本充分混匀,避免抽样误差影响精子计数。如低倍镜、高倍镜检查均无精子,应将精液离心沉淀后再涂片检查,如两次均无精子,报告“无精子”。
7.4观察精子形态的同时也要注意有无红细胞、白细胞、上皮细胞和肿瘤细胞及有无未成熟的生殖细胞。衰老的精子体部膨大并有被膜,不宜列入异形精子。
7.5出现一次异常结果,应隔一周后复查,反复查2-3次才能得出比较正确的结果。
8.异常结果处理
精液常规试验结果异常需与临床诊断相符合,不符合的结果应复查。
9.报告时间与标本保存
9.1病房患者检验结果报告单在24小时内发回科室,门诊病人检验结果报告单在收到标本后1小时领取化验单。
9.2精液试验检查过的标本不保存。
10.临床意义
10.1一般性状检查
10.1.1量:正常人一次排精2~5ml。
10.1.2颜色:正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和肿瘤,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。
10.1.3液化时间:正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。
10.1.4酸碱度:pH值。正常精液呈弱碱性pH7.2-8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。
10.2显微镜检查。
10.2.1精子存活率:排精后30~60分钟,正常精子存活率应为80%~90%,精子存活率降低是导致不育的重要原因。
10.2.2精子活动力:正常精子活动力应在III级以上,若40%的精子活动不良,常是导致男性不育的重要原因。精子活动力低,主要见于精索静脉曲张、泌尿生殖系统非特异性感染,应用某些药物如抗疟药、雄激素等所致。
10.2.3精子计数:正常人精子计数为10~×/L,相当于一次排出的精子总数为×~×。当精子计数值20×/ml或一次排精总数×为精子减少,超过致孕极限而导致不育。精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精子为无精症。见于先天性睾丸发育不全、畸形或后天睾丸损伤和萎缩(如睾丸结核、炎症、淋病、垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等)、输精管阻塞或是先天性输精管及精囊缺陷,是导致少精或无精的重要原因,也是导致不育的重要原因。检查有无精子也是检查输精管结扎术的效果观察。结扎六周后,连续检查无精子,说明手书成功,如果结扎两个月后,精液中仍有精子,说明手术不成功。
10.2.4精子形态:正常精液中,异常形态精子应少于10%~15%,如果精液中异常形态精子数20%,将会导致不育,可能是由于精索静脉曲张、血液中有毒代谢产物、铅污染等或应用大剂量放射线及使用细胞毒性药物导致的精子形态异常。如果精液中发现1%的病理性未成熟细胞,包括精原细胞、精母细胞和发育不完全的精细胞,提示睾丸的曲细精管的生精功能受到药物或其他因素影响或损伤。如果精子凝集10%,提示生殖道感染或免疫功能异常。
11.生物参考值区间:
正常人精液量正常为2~6ml(平均3.5ml);1小时内完全液化;pH为7.2~8.0;精子密度为60~×/L(WHO规定参考值为>20×/L);正常精液中的异常精子应小于30%;正常人精子活率≥0.70
12.参考文献
12.1叶应妩,王毓三主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司.南京.第二版..
12.2黄宇烽,许瑞吉主编.男科诊断学.第二军医大学出版社.第一版..
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