作者：曹兴午
开篇词随着时代的步伐，与时俱进，创建《精液细胞学论坛》栏目，就精液检测领域的一些问题，不拘一格、随心所欲，畅叙我们在临床实验室的成功、经验、教训、病例、人物、事件，主要是给后人留下可参考、启迪的智慧和精神世界，为检验医学事业培养人才，推动医学科学研究健康发展。
我在临床实验室摸爬滚打65年，在船到码头车到站的年华，即将走完人生。每个人都有不同的业绩，每个人内心世界都有不朽的史籍，把我们探索的结果，记录下来留给后人是我们责无旁贷的义务。当前检验医学迅速发展的今天，后浪催前浪，后浪展辉煌的大好时光，为力挺后起之秀的成长，更是时不待我。目前男科学的实验诊断凸显滞后，为此，建立这样平台，把我几十年探索工作，记录下来留给后人，由他们继续探索、发扬，科学研究永远没有终点。
精液细胞学(Semencytology)精液细胞学(Semencytology,SC)含义更广泛、涵盖了精液中显微镜下可见到的所有内含物。概括了所有生殖道从精液中排出和显微镜下可能检测到的物质，包括：细胞、结晶、骨架、微生物、碎片和残渣等。这些有形成分是睾丸和生殖道的代谢产物，是反映睾丸生殖功能和附属腺功能的具体表现，是评价生殖道功能的有利手段，对评价和维护男性生殖和性健康至关重要，是诊疗和评估疗效的重要指标，为观察睾丸生殖功能障碍与生殖激素代谢综合征和治疗不育症提供治疗的理论依据[1、2]。应引起检验医学与男科学界的高度重视，均应将精液涂片进行染色检查，就检验人员来说是细胞形态学检测的基本功，更应该是能够得心应手地评估结果与进行临床解读[3]。
[1]曹兴午，李宏军，白文俊，等.精液脱落细胞学与睾丸组织病理学[M].第1版.北京：北京大学医学出版社，，1，44、73、82-.
[2]曹兴午，王立红，袁长巍，等.精液病理学检测与临床意义[J].现代检验医学杂志.,28[3]：1-8.
[3]曹兴午.我是协和人——65年践行转化医学的轨迹[J].现代检验医学杂志，,29(5)1-22,27.
1精液细胞学内容与分类(1)睾丸生殖细胞：间质细胞、支持细胞、生精细胞(精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞)和精子、支持细胞骨架、微管、微丝[1]。
(2)非生殖细胞：吴明章报告[4]：生育者精液中，非精子细胞占精液总数的1.88%,生精细胞占83.4%;支持细胞占1.2%;白细胞占9.1%。多型核白细胞占5.4%，巨噬细胞占2.6%，淋巴细胞占1.1%。在淋巴细胞中以CD8+细胞：CD4细胞为3;6。精液中以中性粒细胞最常见约为60%~80%，其次为巨噬细胞，约占炎性细胞的20%~30%，淋巴细胞约占3%~10%，偶尔见到嗜酸细胞。生精小管内细胞转化(cellulartransform):界膜中有单核细胞，在一定条件下转化为巨噬细胞，其在传递和处理抗原方面起重要作用，在免疫性炎性反应中起重要作用。睾丸炎可见巨噬细胞通过界膜进入生精小管官腔。可随精液排出，精液可检测巨噬细胞[5]，仍然有其他细胞应鉴别。
[4]吴明章，林其德.生殖疾病诊断学[M].上海，上海科学技术出版社，：42-43，58.
[5]曹兴午，杨文质，赵广明.精液分析与不育症——生精细胞凋亡、胀亡与精子形态学图谱(中英对照)[M].北京：中国人口出版社..,-.
尚可检测到异常淋巴细胞、红细胞;
(3)生殖道上皮系统：前列腺上皮、精囊上皮、附睾上皮、尿道上皮、肾上皮、阴道上皮(来自女性)。
(4)睾丸与前列腺结晶：如含铁血黄素结晶、精胺酸结晶、前列腺结石;
(5)微生物：细菌与菌沙、加德纳菌、线索细胞、病毒脂质体和包涵体;
(6)其他有形成分：颗粒残渣、脂滴、组织纤维等。总之，精液中的有形成分都可以考证睾丸的生殖功能状态和病理性损伤的程度，为此，不应轻视任何精液内容，都应该是检出作为观察的指标，尤其生精细胞凋亡的检测已经应用[1]，我们必须认真检测与辨识，提高实验诊断水平，为临床提供有利的诊断和治疗依据。
2睾丸生精小管构成与量化1.生精小管构成
图1生精小管模式图参考[1,6]制图
[6]EberhardNieschlag等主编.李宏军，李汉忠主译.男科学——男性生殖健康与功能障碍[M].北京，北京大学出版社.,p30-32.
图解：血睾屏障(红色)，上端(蓝色)为支持细胞与支持细胞之间形成的紧密连接(TJ)，在血睾屏障的连接中起重要作用，是构成血睾屏障(BTB)最重要的组成成分。对于来自血液中的各种物质的通透性和选择性都很强，是血睾屏障最不容易通过的结构，而BTB的有序存在和开放是精子生成的保证[5，17]。生精细胞镶嵌在支持细胞生长发育、成熟产生精子，为此，是当前研究的热点。
血睾屏障(BTB)下端生精上皮基膜，外侧有肌样细胞(绿色)，毛细血管(病理切片可见内含有红细胞)，间质结缔组织(浅黑色)和间质细胞(黄色)，还有免疫细胞：巨噬细胞(MP)(每10~50个间质细胞含有1个巨噬细胞。成人睾丸间质细胞中有25%为巨噬细胞)、树突状细胞(D)、肥大细胞(M)、T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞以及在血管迁移部位的粒细胞[5]。(在严重生精障碍的生精小管的睾丸活检中有淋巴细胞包绕，在腮腺炎患者的睾丸组织中，有35%的病例伴随严重睾丸炎性反应)[6]。
2.生精小管量化：成人健康的睾丸长度约4.5cm，宽度约2.5cm，厚度约3.0cm，(4.5×2.5×3.0=33.8cm)，重量约12g(10.5~14.0g)[1,6]。生精小管被白膜包裹呈~个小叶，每叶1~4个盘旋的生精小管，长度：单侧米，双侧米。生精上皮由支持细胞(Sc)和5~8层同心圆的生精细胞包括：精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子组成，一个精原细胞可分裂产生个精子[4]。支持细胞位于基膜，细胞质向生精小管管腔延伸，伸出许多不规则的突起，侧面与腔面生精细胞发育成熟以致精子发生都镶嵌在上面，是生精上皮的支持结构。支持细胞的特殊的细胞质结构，成为精子定向分化过程的基础[5]。每5个支持细胞连接形成一个细胞网，生精细胞均镶嵌在支持细胞的细胞质上，吮吸营养、发育、繁殖、成熟和产生精子[1,6]。支持细胞占生精上皮容量的35%~40%。生精功能完整的睾丸内含有~×个支持细胞[7]，或睾丸组织含有25×/g支持细胞[8]。人类睾丸间质占睾丸容积的12%~15%，其中间质细胞(Leydigcell)占10%~20%。人类睾丸中含约×个间质细胞[4]。
生精小管直径[4，7，9]：精子发生功能完整为μm;精子发生功能低下为μm;精子功能阻滞μm;唯支持细胞综合征≤μm。睾丸生精小管管径缩小是由于Sc萎缩(幼稚化)和生精细胞大量脱落形成，进一步导致睾丸逐渐萎缩，体积缩小(Sc支柱功能降低)[9]。Sc增生是一种正常现象，保持一定高度和幅度，是维持睾丸良好生殖功能的必然条件。生精上皮高度：精子发生功能完整≥80μm;精子发生功能减低80μm;精子发生受阻≥60μm;唯支持细胞综合征20μm[9]。
[7]郭应禄，辛钟成主编.男子生殖医学[M].北京，北京医科大学出版社.2，第一版，-.
[8]曹兴午，乔博义，施长春，等.成功治疗精索静脉曲张致严重少精子一例报告[J],生殖医学杂志，,23(5)：-.
3.支持细胞与精子生成：每个支持细胞在形态学及功能上与一定数量精子的产生相联系。人类每个支持细胞对应10个生殖细胞或1.5个精子[7]。如果所有支持细胞功能都正常，Sc越多，产生精子的数目越多，睾丸体积就越大。相反支持细胞不正常会萎缩幼稚化，那么，生精细胞数目和精子的数目就相应减少，睾丸体积也会相应缩小,支持细胞的高度随之降低。流式细胞仪证实：睾丸体积大小主要是生精细胞的输出总数决定的，而生精细胞的多寡和生理状态都是与支持细胞的功能密切相关[12]。说明支持细胞在生殖功能的重要性并与男性不育症密切相关[]。
[12]LuetjensCM,WeinbauerGF,WistubaJ,etal.Primatespermatoenesis:Newinsightsinto [13]ZhangC,YchS,ChenYT,etal.Oligozoospermiawithnormalfertilityinmalemicelackingtheandrogenreceptorintestisperitubularmyoidcells[J].ProcNatlAcadSciUSA.,:-.
3支持细胞间形成紧密连接是血-睾屏障(blood-testisbarrier，BTB)的主要组成部分近年研究发现，精子发生过程中支持细胞紧密连接(tightjunction,TJ)的重建，可能与生精细胞发育过程及生精细胞穿过血睾屏障密切相关。因此，紧密连接与血睾屏障的研究受到重视[5,16]。
1.支持细胞与生殖细胞连接结构——紧密连接成分与功能：是在相邻Sc基部细胞膜之间形成的互相连接的结构，主要分3类连接：紧密连接(tightjunction,TJ)、锚定连接(anchoringjunction,NJ)、缝隙连接(gupjunction,GJ)结构[16]。电镜形态观察可见在Sc上形成，呈点状、斑状或带状的分布状态，是由闭锁蛋白(occludins)、紧密连接蛋白(claudins)、连接粘附分子(junctionalabhesionmolecules,JAMs)等主要成分构成，至今已报道余种，这些蛋白在细胞之间的连接和细胞的功能性方面起到重要作用[17,18]。
2.支持细胞与血睾屏障：支持细胞之间形成紧密连接是血睾屏障的主要组成部分。支持细胞之间形成的网状结构，紧密连接在一起，将生精上皮分隔成基底室和近腔室。在基底室生长精原细胞和细线期精母细胞，在近腔室发育着晚期初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子的生长[17,18]。近年发现，精子发生过程中支持细胞紧密连接的重建可能直接或间接与生精细胞发育过程及生精细胞穿过血睾屏障(BTB)有密切联系[16]。在紧密连接尚存在有锚定连接包括：粘附连接(adherenjunction,AJ)、细胞外质特化(ectoplasmicspecialization,ES)、管状复合物(tubuloulbar [16]祝辉，崔毓桂，周作民，等.睾丸细胞生物学研究进展[J].生殖医学杂志，,23(4)：-.
[17]LeeNP,WongEW,,Mruk,DD,etal.TesticularcelljnuctionAnovelformalecontracepiton[J].CurrMedChem,9,16:-.
[18]ChengCY,MrukDD.Celliunctiondynamicsinthetestis:Sertoli-germcellinterctionsandmalecontracptivedevelopment[J].PhysiolRev,2,82:-.
3.血睾屏障的免疫功能：睾丸生殖过程精原细胞增殖向精母细胞分化、发育和繁殖中，产生许多新生代的细胞，这些细胞表面和细胞内开始蛋白表达，与体内其他蛋白比较，从免疫学角度看，这些蛋白都是睾丸所特有的，具有免疫性的新蛋白。更由于Sc形成特有的复杂的紧密连接，将生精小管内物质与血管隔开。为此，血睾屏障为免疫细胞和生殖细胞提供了免疫隔离。血睾屏障提供了自我抗原系统免疫耐受的基础，说明生精小管是存在免疫豁免区域[5]。Bellgrau报告[19]：在小鼠睾丸中，Sc是维持其免疫豁免功能的主要细胞，对免疫豁免功能的维持首先是以Sc通过紧密连接，形成血睾屏障来实现的[19]。
[19]BellgrauD，GoldD，SelawryHP，etal.AroleforCD95ligandinpreventinggraftrejection[J].Nature，l，():-.
但是，在睾丸尤其是睾丸发育到精子进入附睾的睾丸网时，对病毒与细菌感染有很强的应激反应，证明睾丸具有正常的炎性反应。由于在睾丸网具有类似Sc特殊的网状排列方式，形成有很多巨噬细胞的瓣膜进行免疫监视。在睾丸网处可以发生的自身免疫性睾丸炎说明，睾丸的免疫豁免性不仅在于血睾屏障，还有赖于睾丸内的特殊免疫调节功能。特别提及睾丸内雄激素水平可能对睾丸免疫豁免的维持起到重要作用[5]，这一点非常重要应引起临床的重视。
[14]YanHH,MrukDD,WongEW,etal.Anautocrineaxisinthetestisthatcoordinatesspermiationandblood-testis-barrierrestructuringduringspermatogenesis[J].ProcNatlAcadSciUSA.8,:-.
[15]MarinaGY，AminaS，FontaineI，etal.DimericTransferrinInhibitsPhagocytosisofResidualBodiesbyTesticularRatSertoliCells[J].Biologyofreproduction，8，78，-.
总之血睾屏障(BTB)可阻止血液中有害物质进入生精小管，保护减数分裂后的生殖细胞不受外来毒素的侵害，并维持睾丸局部免疫豁免功能和保护睾丸的微环境。
[1]EddyEM.Malegermcellgeneexpression[J].ReccntProgHormRes2,57:-.
[2]PetersenC,SoderO.Thesertolicell-ahormonaltargetAnd‘super’nurseforgermcellsthatdetterminestesticularsize[J].HormRes.;66(4):-.
[3]CaneguimBH,CemPS.SpolidorioLC,etal.Structuralalterationsintheseminiferoustubulesofratstreatedwithimmunosuppressortacrolimus[J].ReprodBiolEndocrinol，9,7:19.
[4]曹兴午，李宏军，白文俊，等主编.精液脱落细胞学与睾丸组织病理学[M].第1版.北京：北京大学医学出版社，,1-14,-,-.
[5]EberhardNieschlag等主编.李宏军，李汉忠主译.男科学——男性生殖健康与功能障碍[M].北京，北京大学出版社.,p30-32.
[6]郭应禄，辛钟成主编.男子生殖医学[M].北京，北京医科大学出版社.2，第一版，-.
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[8]RaleghD,O’DonnellL,SouthwickGJ,dekretserDM,etal.Stereologicalanalysisofthehumantestisaftervasectomyindicatesimpairmentofspermatogenicefficiencywithincreasingobstructiveintervl[J].FertilSteril.4,81:-.
[9]曹兴午，乔博义，施长春，等.成功治疗精索静脉曲张致严重少精子一例报告[J],生殖医学杂志，,23(5)：-.
[10]ChridtopherDeJonge等编.李铮，陈荪宏，何祖平，主译.精子细胞：生成成熟受精再生[M].上海，上海科学技术文献出版社，，第一版.p6，87，
[11]JohnsonKJ,BockelheideK.DynamictesticularadhesionjunctionsareimmunologyicallyuniqueII.Localizationofclassiccadherinsinrattestis[J].BiolReprod,2,66;-0.
[12]LuetjensCM,WeinbauerGF,WistubaJ,etal.Primatespermatoenesis:Newinsightsinto [13]ZhangC,YchS,ChenYT,etal.Oligozoospermiawithnormalfertilityinmalemicelackingtheandrogenreceptorintestisperitubularmyoidcells[J].ProcNatlAcadSciUSA.,:-.
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[15]MarinaGY，AminaS，FontaineI，etal.DimericTransferrinInhibitsPhagocytosisofResidualBodiesbyTesticularRatSertoliCells[J].Biologyofreproduction，8，78，-.
[16]祝辉，崔毓桂，周作民，等.睾丸细胞生物学研究进展[J].生殖医学杂志，,23(4)：-.
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[20]曹兴午，施长春，齐来增，等.精索静脉曲张、AZFc缺失和腮腺炎史一例报告[J].生殖医学杂志，,22(12)：-.
[21]GuoJie，FangNan-zhu，LIZhong-shu，etal.ReviewinStructure，FunctionsandCurrentProgressofSertoliCell[J].JournalofAnimalScienceandVeterinaryMedicine，8，27(1):40-42.
4支持细胞损伤考量指标既然睾丸内支持细胞如此重要，临床室必须考虑，观察考量支持细胞损伤后表现出的指标，为临床诊疗提供参考思路，为此，笔者归纳内容：
1.基膜增厚-血睾屏障破坏：基膜增厚是睾丸损伤的常见病理现象，增厚的程度和损伤程度与时间成相关性，基膜厚度[2]：精子发生功能完整为≤8μm;精子发生功能低下8μm;精子功能阻滞8μm;唯支持细胞综合征10μm;生精小管硬化12μm。Guillou等[8]和Fredricsson等[9]证明：界膜正常结构受损是支持细胞幼稚化(萎缩)的重要因素之一。幼稚化的支持细胞不能维持适宜的生精内环境。Regadera等[10]发现男性睾丸女性化综合征的生精小管，界膜增厚和透明化，类似的变化可在免疫性睾丸炎、VC和成年隐睾的生精小管界膜出现[10]。[曹9]
[2]郭应禄，辛钟成.男子生殖医学[M].北京，北京医科大学出版社.2，第一版，-
[8]GuillonF,Monet-KuntzC,FontaionI,etal.Exressionoffetal-typeintirmentsby17-day-oldratSertolicellscultureonreconstructedbasenentmembrane[J].CellTissueRes.,(2):-.
[9]FredricssonB,CarlstromK,PloneL,etal.Steroidmetabolismandmorphologicfeaturesofthehumantestes[J].J.Androl,,10(1):43-47.
[10]RegaderaJ,MartinezGF,PaniaguaR,etal.Androgeninsensitivitysyndrome:animmunohisttochemical,ultrastructural,andmorphometricstudy[J].ArchPatholLabMed,,(30):-.
为此[11]：切断了支持细胞通过肌样细胞或界膜与间质细胞之间的互相调节(生殖激素调控)，导致支持细胞和间质细胞功能紊乱，破坏了微环境调节;破坏使支持细胞和精原细胞失去赖以生存的营养和雄激素结合蛋白的合成能力;造成界膜通透性改变，破坏了血睾屏障，使生精小管内的抗原易暴露或渗出，导致免疫豁免失控。可能是睾丸生殖功能障碍的共同病理环节[11]。
[11]孙辉臣，董志英，丁卫东，等.不育症患者睾丸曲细精管界膜的病理学观察[J].中国男科学杂志，0,14(4)：-.
2.生殖激素反映[14]：LH及T主要是观察睾丸间质细胞功能，T/LH比值是间质细胞功能障碍更敏感的指标，正常情况下T/LH比值应2.12，当T/LH比值下降，说明间质细胞已有损害[14]。从T/LH比值与睾丸容积看，刘睿智报告[15]例非嵌合型克氏综合征与T/LH值：年龄范围25岁～31岁;睾丸大小左3.4ml～7.33ml;精液量1.84ml～2.91ml;T：6.77~8.68nmol/L;LH：19.47～25.68IU/L;T/LH比值0.35～0.34;FSH21.47～35.28IU/L。结果显示总体睾丸体积小、无精子、无生精细胞的睾丸体积更小;生殖激素处于高促状态，说明支持细胞功能减退;T/LH比值都1，睾丸损伤基膜区，间质细胞分泌T水平降低。
杨慎敏等报告[16]，例不同类型AZF微缺失的临床特点分析:睾丸总体积为20~33ml;T为11.16~13.83nmol/L;LH为4.81~6.26IU/L;T/LH比值为2.06~2.56;FSH为11.08~13.41IU/L。
说明睾丸容积太小与T/LH比值密切相关性，睾丸容积10ml者T/LH比值1;睾丸容积20ml者T/LH比值2。
冯俭等报告[17]当FSH、LH上升,T/LH的比值下降提示睾丸功能损害伴睾丸容积减少。若T/LH值的明显降低或单独T值明显降低,可判断睾丸生精小管和间质细胞的同时损害[17,18]。
[14]郭应禄，胡礼泉.男科学[M].北京人民卫生出版社.第一版，4,.
[15]刘睿智.年男性生殖医学新进展高级研讨会课件光盘资料[J/OL].中国性科学杂志、中国性学会性医学专业委员会男科学组、医院，年.
[16]杨慎敏，李海波，温端改，等.无精子症患者中无精子因子微缺失分布[J].生殖医学杂志，,22(3)：-.
[17]冯俭,张水林,吴志君,等.男性不育例生殖激素水平测定分析[J].南通医学院学报,1∶21(1):53-54.
[18]Rodrigaucs-RigauLJ.Harmomalcontrolofspermatogenesisinman.Comparison.Withtherat.In:steinbergerA,SteinbergerE,Testiculardevelopment,structureandfunction[J].NewYork:Rovenpress,,.
在睾丸取精(TESE)时，应具备正常睾丸大小、正常的卵泡刺激素(FSH7IU/L)，如果为高促FSH≥7，说明局灶性的精子发生损害，即与之相关的完全性与局灶性的唯支持细胞综合征。可提取局灶部位以外的其他部位的睾丸精子，联合单精子注射/体外受精(ICSI/IVF)[男科学]。
3.抑制素B检测与支持细胞损伤：抑制素(inhibin，INH)为一类糖蛋白激素，主要来自支持细胞，能够选择性地抑制FSH，发挥着极强的负反馈调控作用。FSH升高可能是由于睾丸支持细胞-曲细精管复合体受到损伤，支持细胞的功能受损或功能降低，不能分泌足够的INH来调控FSH浓度，也可由间质细胞受累，导致T分泌减少，。
张锋报告[]:抑制素B提供一个准确的睾丸支持细胞的测量指标，血清FSH浓度是支持细胞功能与精子生成的间接标记物，而抑制素B的浓度是一个反应支持细胞和精子生成能力的指标。在进行TESE术之前，除测FSH外，应测抑制素B。在临床上高促的患者，应测抑制素B，常可能是支持细胞损伤或功能下降表现。
[]张锋，黄永富，王冲，等.抑制素B检测预测非梗阻性无精子症患者睾丸精子获取术成功的价值[J].黑龙江医学，,37(11)：1-4.
目前常用参考值：功能健康：为75-pg/ml，可疑功能障碍：50-80pg/ml,功能障碍：50pg/ml[]。
[]取自德国柏林医学诊断检验中心(MedicalDiagnosisInstitute,BerlinGermany,MDI)报告单。
3.细胞学观察：睾丸生精小管是细胞密集、生长、分裂、繁殖、发育和代谢活跃的器官。
精液脱落细胞学中已经检测到:生精细胞的多形态、凋亡、胀亡，基膜组织纤维、支持细胞骨架以及炎性细胞的形态等[]。睾丸组织病理学中，睾丸的不同病理变化以及支持细胞的测量、生殖细胞的不同变化[曹]。本文不赘述。
[]曹兴午，白文俊，罗世芳，等.二次腮腺炎睾丸炎、精索静脉曲张网络会诊[J].中华临床医师杂志(电子版)，,7(19)：-.
结论：基础疾病、生物、物理、化学和环境因素对睾丸都可以造成不同的损伤，引起细胞的不同病变。从①生物细胞学观点：细胞代谢旺盛对外界影响因素敏感，细胞结构松散容易受到攻击，支持细胞属此类，首当其冲受有害因素地侵袭，会引起一系列生殖细胞的连锁反应;②有效计量学观点：细胞损伤程度取决时间、剂量与细胞体积密切相关，支持细胞与生殖细胞比较，体积最大，损伤可能最大;③细胞耐受性观点：细胞的耐受能力取决其功能与代偿性恢复，支持细胞是代偿性非常良好的，有害因素损伤导致生精小管完全空化时，唯有幼稚化的支持细胞在生精小管内坚守;④细胞数量观点，支持细胞与生殖细胞比较又显得微乎其微，而代谢最多、最活跃的是精母细胞与精子，但其必须依托支持细胞的“抚养”;⑤细胞功能学观点：为此，支持细胞仍然是关键。
4.基因表达线粒体观察：线粒体为一双层膜围成的囊状结构，由内膜、外膜、外室、基质构成，存在于内膜的质子泵将基质内质子泵入外室，从而形成内负外正的线粒体跨膜电位(△ψm),跨膜电位对维持线粒体正常功能是必要的[17],由于跨膜电位的存在才使得正电荷的荧光染料，如JC-1、CMX、ROS染料对线粒体的染色效果与跨膜电位(△ψm)有关，而跨膜电位(△ψm)又可以反映线粒体活性。荧光染色结果显示：实验组TM4细胞线粒体荧光强度相对于对照组而言显著降低，表明实验组影响了细胞线粒体的活性。另外，透射电镜结果也显示实验组细胞线粒体呈空化且线粒体嵴消失。这两项实验都表明RNA干扰棕榈酰蛋白硫酯酶(PPT-1)基因会影响细胞线粒体的结构与功能。
附形态观察：激光共聚焦显微镜观察：实验组TM4细胞的线粒体荧光强度较对照组显著下降;荧光生物发光仪检测活性线粒体荧光强度，实验组的细胞线粒体荧光强度明显下降;与对照组比较为P0.05。透射电镜结果也显示实验组细胞线粒体呈空化且线粒体嵴消失。
[周]周婉格，周任，王统菲，等.RNA干扰PPT-1基因表达对小鼠支持细胞功能的影响[J].中国男科学杂志.,28(4)：7-11.
近年对精子功能的研究，已经采用高通路的转录组以及蛋白质组学技术，应用于精子功能及调控的研究，将全面揭示精子功能提供了基础。
随着科学仪器的发展，核磁共振、透射电镜、免疫电镜、激光共聚焦显微镜等仪器出现，睾丸细胞生物学领域的研究大有可为，如间质细胞的分泌与机体的平衡、失衡与调节，支持细胞骨架，支持细胞与生殖细胞的调节与精子的生成与成熟等等。总之，不育症的诊断与诊疗的落脚点与着眼点应该是睾丸的功能。
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